12種 20種 32種 58種多功能細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)器主要特征：

12種 20種 32種 58種多功能細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)器

市場(chǎng)上近幾年涌現(xiàn)出不少自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器。這種儀器利用光學(xué)顯微鏡技術(shù)，但帶來(lái)了更高的準(zhǔn)確性、重復(fù)性，并將這一單調(diào)的工作自動(dòng)化。樣品體積小也是這種細(xì)胞計(jì)數(shù)器的額外優(yōu)勢(shì)。許多儀器使用一次性的玻片，只需要10-20 uL樣品。將玻片插入自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器中，照相機(jī)捕獲圖像。隨后內(nèi)置的軟件分析圖像，顯示細(xì)胞數(shù)量等信息。
在此，專(zhuān)家介紹了使用自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器的三個(gè)tip。
準(zhǔn)確對(duì)焦
與其他光學(xué)顯微鏡一樣，儀器的準(zhǔn)確對(duì)焦對(duì)于計(jì)數(shù)很關(guān)鍵。在手動(dòng)計(jì)數(shù)時(shí)，訓(xùn)練有素的大腦可輕松鑒定細(xì)胞。然而，自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器內(nèi)的照相機(jī)檢測(cè)活細(xì)胞的亮中心和暗邊緣，將其處理成黑白像素信息。如果細(xì)胞未準(zhǔn)確對(duì)焦，那么亮中心將有明顯的灰度，會(huì)被誤認(rèn)為是死細(xì)胞。
大部分研究人員將會(huì)發(fā)現(xiàn)對(duì)焦并不難，只要顯示在屏幕上的圖像質(zhì)量與傳統(tǒng)的顯微鏡相似。確保你有一張清晰的圖像，這很重要。另一點(diǎn)是要了解細(xì)胞計(jì)數(shù)器中照相機(jī)的分辨率。如果自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器以低的幀速顯示，如每秒小于15幀，那么顯示的圖像將不能實(shí)時(shí)響應(yīng)聚焦旋鈕的微調(diào)。
控制玻片之間的差異
大部分基于圖像的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器都使用一次性的玻片，其上有明確的測(cè)量區(qū)域。這一測(cè)量區(qū)域被物鏡的放大率和照相機(jī)的圖像傳感器大小所設(shè)定。這些細(xì)胞計(jì)數(shù)器通常測(cè)定0.4-0.5 uL樣品，相當(dāng)于計(jì)數(shù)器的4-5個(gè)大方格。
與計(jì)數(shù)器不同，計(jì)數(shù)玻片通常只使用一次。因此，玻片之間的差異會(huì)顯著影響細(xì)胞計(jì)數(shù)的結(jié)果。對(duì)于某一組實(shí)驗(yàn)，好使用同一批號(hào)的玻片，盡量避免這些差異。在更換批號(hào)時(shí)，也建議用標(biāo)準(zhǔn)的微珠來(lái)檢驗(yàn)玻片。大部分細(xì)胞計(jì)數(shù)器制造商都提供已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)微珠。使用相同的微珠樣品來(lái)檢驗(yàn)不同的玻片，將有助于發(fā)現(xiàn)差異。
評(píng)估軟件的分簇性能
自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器的核心是開(kāi)展分析的軟件，它相當(dāng)于手動(dòng)計(jì)數(shù)時(shí)的人腦。大部分的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器包含集成軟件，能準(zhǔn)確地計(jì)算單細(xì)胞群體的數(shù)量。然而，在談到成簇細(xì)胞的計(jì)數(shù)時(shí)，細(xì)胞計(jì)數(shù)器就會(huì)存在明顯差異。由于從培養(yǎng)細(xì)胞中獲得的樣品并不總是單細(xì)胞群體，因此，有時(shí)會(huì)有多個(gè)細(xì)胞團(tuán)塊，而自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器的分簇（declustering）性能也仔細(xì)評(píng)估。評(píng)估分簇性能時(shí)可開(kāi)展圖1的檢測(cè)。
圖1. 將HL-60細(xì)胞加熱到70°C，處理20分鐘，殺死細(xì)胞，獲得死細(xì)胞樣品。隨后利用兩款不同的自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器進(jìn)行樣品的檢測(cè)。在細(xì)胞計(jì)數(shù)之后，根據(jù)軟件捕獲的圖像進(jìn)行比較。紅色圓圈：死細(xì)胞；藍(lán)色圓圈：活細(xì)胞；黑色圓圈：排除的對(duì)象。
自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器正在取代單調(diào)乏味的手動(dòng)計(jì)數(shù)方法。隨著對(duì)一些基本原理的了解，自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)器將幫助你獲得佳的結(jié)果。

12種 20種 32種 58種多功能細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)器細(xì)胞計(jì)數(shù)器是集計(jì)數(shù)、統(tǒng)計(jì)、顯示為一體的微電腦控制的計(jì)數(shù)儀器。計(jì)數(shù)準(zhǔn)確可靠，符合臨床檢驗(yàn)血常規(guī)結(jié)果，并又初步提示分辨細(xì)菌感染或病毒感染。細(xì)胞計(jì)數(shù)器使用方便，適用于中、小型醫(yī)院臨床檢驗(yàn)細(xì)胞分類(lèi)計(jì)數(shù)。
細(xì)胞計(jì)數(shù)器操作步驟
1.按下電源(Power)按鈕，開(kāi)啟儀器。顯示開(kāi)啟界面。
2.自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀預(yù)設(shè)為細(xì)胞(Cell)模式。如果是其他模式請(qǐng)?jiān)O(shè)置改為細(xì)胞(Cells)模式。
3.將10μL樣本加至10μL臺(tái)盼藍(lán)染料中，上下吹打，輕輕混勻。
4.將10μL樣本混合物加入到細(xì)胞計(jì)數(shù)板一側(cè)的計(jì)數(shù)池口中。計(jì)數(shù)板的兩個(gè)計(jì)數(shù)池分別標(biāo)記為“A"和“B"，以便于追蹤您的樣本。你既能夠用一個(gè)計(jì)數(shù)池進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，也能夠兩個(gè)同時(shí)使用。

5.插入細(xì)胞計(jì)數(shù)板，先把A側(cè)樣本插入到細(xì)胞計(jì)數(shù)板接口，保證A側(cè)樣本插入到儀器中。若細(xì)胞計(jì)數(shù)板插入正確，那么就會(huì)聽(tīng)到咔嗒一聲。每個(gè)計(jì)數(shù)池單獨(dú)計(jì)數(shù)。
6.按下計(jì)數(shù)細(xì)胞(CountCells)或下一個(gè)樣本(NextSample)按鈕。
7.按縮放(Zoom)按鈕調(diào)節(jié)圖像。在網(wǎng)格中通過(guò)點(diǎn)擊目標(biāo)區(qū)域來(lái)導(dǎo)航。
8.通過(guò)縮放模式查看細(xì)胞時(shí)，可以使用焦距旋鈕調(diào)節(jié)圖像。在對(duì)diyi個(gè)樣本計(jì)數(shù)后，不需要又一次使用焦距旋鈕。若檢測(cè)的多個(gè)樣本大小差不多的話(huà)，就可以鎖定焦距旋鈕。之后也可解鎖焦距旋鈕，調(diào)節(jié)圖像。調(diào)節(jié)圖像使得活細(xì)胞(Livecells)中心亮，邊緣暗，死細(xì)胞(Deadcells)的整個(gè)細(xì)胞區(qū)域呈均勻的藍(lán)色，沒(méi)有中心亮點(diǎn)，以便數(shù)據(jù)分析。
9.如果圖像效果很好的話(huà)，按下計(jì)數(shù)細(xì)胞(CountCells)。
10.儀器完成一個(gè)樣本的計(jì)數(shù)大概需要30秒，屏幕上會(huì)顯示活細(xì)胞數(shù)、死細(xì)胞數(shù)、細(xì)胞總數(shù)以及存活率百分比。記錄細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果，或插入U(xiǎn)SB驅(qū)動(dòng)器，保存(Save)數(shù)據(jù)。
11.計(jì)數(shù)完成后，按下詳情(Details)按鈕，查看每個(gè)細(xì)胞的計(jì)數(shù)情況。細(xì)胞情況通過(guò)藍(lán)色、紅色或黑色圓圈顯示。藍(lán)色表示細(xì)胞被計(jì)數(shù)為活細(xì)胞，紅色表示被計(jì)數(shù)為死細(xì)胞，黑色表示目標(biāo)沒(méi)有被計(jì)數(shù)。
12.如果查看數(shù)據(jù)詳情及圖示數(shù)據(jù)，請(qǐng)選擇更多數(shù)據(jù)(MoreData)按鈕。
13.計(jì)數(shù)板A側(cè)完成計(jì)數(shù)后，先將計(jì)數(shù)板輕輕向里一推，然后再拉出來(lái)，拿開(kāi)計(jì)數(shù)板，對(duì)計(jì)數(shù)池的另一側(cè)進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)(B側(cè))。把計(jì)數(shù)板轉(zhuǎn)過(guò)來(lái)，再插入細(xì)胞計(jì)數(shù)板接口，重新開(kāi)始計(jì)數(shù)。
14.自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀的內(nèi)存只能保存一組數(shù)據(jù)。所以每次讀數(shù)后，記錄或保存好數(shù)據(jù)。
15.記錄或保存數(shù)據(jù)后，計(jì)數(shù)板不能重復(fù)使用請(qǐng)妥善處理。
16.這個(gè)時(shí)候，細(xì)胞計(jì)數(shù)儀已準(zhǔn)備好，可以檢測(cè)下一個(gè)樣本。如果不再使用儀器，按電源(Power)按鈕關(guān)閉儀器。